在細(xì)胞生物學(xué)與毒理學(xué)研究中,HEPM細(xì)胞是一種有特定來(lái)源和用途的工具細(xì)胞。它的全稱是人胚胎腭間充質(zhì)細(xì)胞,從人類胚胎腭部間充質(zhì)組織分離而來(lái),種屬來(lái)源為人。細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)。培養(yǎng)條件通常為DMEM-H培養(yǎng)基,添加10%胎牛血清和1%青霉素/鏈霉素,置于37℃、5%CO?的培養(yǎng)箱中。需要說(shuō)明的是,該細(xì)胞僅供科研使用,不可用于臨床診斷和治療。
HEPM細(xì)胞雖然源自胚胎腭部這一相對(duì)專門的組織,但作為間充質(zhì)細(xì)胞,它在顱面發(fā)育、疾病建模和毒理應(yīng)答研究中都有應(yīng)用。其天然高表達(dá)EGF受體,并活躍于MAPK、Wnt等發(fā)育相關(guān)通路,因此常被用來(lái)解析這些通路在組織形態(tài)建成中的功能。
在具體科研應(yīng)用中,HEPM細(xì)胞主要涉及幾個(gè)方向。在發(fā)育生物學(xué)方面,它可用于解析腭部形成和顱面骨骼發(fā)育的分子機(jī)制。在毒理學(xué)評(píng)價(jià)方面,它可作為環(huán)境污染物和藥物發(fā)育毒性的測(cè)試載體,直觀展示環(huán)境毒素如何干擾細(xì)胞正常功能。在再生醫(yī)學(xué)方面,科研人員會(huì)探究其多向分化潛能,為顱面組織修復(fù)尋找可能的種子細(xì)胞來(lái)源。在基因功能研究方面,它可作為轉(zhuǎn)染宿主,用于驗(yàn)證與發(fā)育相關(guān)的miRNA和基因功能。
一項(xiàng)發(fā)表于Ecotoxicology and Environmental Safety的研究,為HEPM細(xì)胞的應(yīng)用提供了實(shí)例。該文獻(xiàn)題為《Elucidating tobacco smoke-induced craniofacial deformities:Biomarker and MAPK signaling dysregulation unraveled by cross-species multi-omics analysis》,通過(guò)HEPM細(xì)胞與斑馬魚的跨物種模型,揭示了香煙煙霧提取物誘導(dǎo)顱面畸形的機(jī)制。研究中,HEPM細(xì)胞被用作人類顱面發(fā)育的細(xì)胞模型,幫助觀察毒性損傷表型,并鑒定關(guān)鍵生物標(biāo)志物和信號(hào)通路。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示了多個(gè)層面的數(shù)據(jù)。CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了不同濃度香煙煙霧提取物在24小時(shí)、48小時(shí)和72小時(shí)對(duì)HEPM細(xì)胞活力的影響。流式細(xì)胞術(shù)通過(guò)Annexin V-FITC/PI雙染分析細(xì)胞凋亡情況。Western blot檢測(cè)了凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá),包括cleaved-PARP、cleaved-caspase-3、bax和bcl-2,并以GAPDH作為內(nèi)參。研究還使用ROS清除劑NAC處理細(xì)胞,觀察其對(duì)細(xì)胞活力、活性氧和線粒體膜電位的影響。此外,研究對(duì)候選miRNA進(jìn)行了蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析和KEGG、GO富集分析,并整合轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)數(shù)據(jù),分析MAPK信號(hào)通路中的差異表達(dá)分子及其相關(guān)性。這些結(jié)果說(shuō)明MAPK通路異常激活是香煙煙霧提取物誘導(dǎo)顱面畸形的核心誘因之一。
圍繞細(xì)胞資源,相關(guān)平臺(tái)也在提供配套服務(wù)。例如吉奧藍(lán)圖構(gòu)建了符合中國(guó)需求的ATCC細(xì)胞庫(kù),打造本土化的細(xì)胞資源平臺(tái),專注于支持規(guī)?;哪[瘤研究。平臺(tái)提供超過(guò)千種細(xì)胞類型及其配套培養(yǎng)試劑。其原代腫瘤細(xì)胞系源自中國(guó)人群,更貼合國(guó)人的疾病發(fā)生和發(fā)展機(jī)制。此外,還提供ATCC、Sciencell、JCRB、RIKEN和DSMZ等國(guó)際細(xì)胞庫(kù)的原裝細(xì)胞代購(gòu)服務(wù),并配套售后服務(wù),以保障細(xì)胞活性和研究的連續(xù)性。